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可见分光光度计透过率及吸光度的测试方法

2016-4-22 11:17:33      点击:
一、可见分光光度计透过率(T)的测试方法

1、将可见分光光度计的电源线的一端插入电源插座,另端接上仪器的插座。
2、打开仪器的开关。
3、可见分光光度计预热30分钟(一般情况下15分钟即可,若已开机数分钟,则无需预热,可直接测试)。
4、配好溶液,将参比液和待测液分别倒入已经配对好的比色皿中。
5、打开样品室盖,将0%T校具(黑体)放入比色槽中,同时将装有参比液和待测液的比色皿分别放进其它的比色槽中。建议将黑体放进第一个槽中,将装有参比液的比色皿放入第二个槽中(若第一个槽中不放黑体,建议将装有参比液的比色皿放入第一个槽中)。盖上样品室盖。
6、旋转波长旋钮设置波长,观察波长显示窗口中的波长移动,直至指定波长。
7、按MODE键,切换到T状态下,将黑体拉(推)到光路中,按0%T键,直至显示0.0。建议每次波长值改变时都要重新校0%T
8、测透过率(T):将参比液拉(推)到光路中,按100%T键,直至显示100.0,再将待测液拉(推)到光路中,即可得出待测液的透过率值。

二、可见分光光度计吸光度(A)的测试方法

1、将可见分光光度计的电源线的一端插入电源插座,另端接上仪器的插座。
2、打开仪器的开关。
3、可见分光光度计预热30分钟(一般情况下15分钟即可,若已开机数分钟,则无需预热,可直接测试)。
4、配好溶液,将参比液和待测液分别倒入已经配对好的比色皿中。
5、打开样品室盖,将0%T校具(黑体)放入比色槽中,同时将装有参比液和待测液的比色皿分别放进其它的比色槽中。建议将黑体放进第一个槽中,将装有参比液的比色皿放入第二个槽中(若第一个槽中不放黑体,建议将装有参比液的比色皿放入第一个槽中)。盖上样品室盖。
6、旋转波长旋钮设置波长,观察波长显示窗口中的波长移动,直至指定波长。
7、按MODE键,切换到T状态下,将黑体拉(推)到光路中,按0%T键,直至显示0.0。建议每次波长值改变时都要重新校0%T
8、测吸光度(A):再按MODE键切换到A状态下,将参比液拉(推)到光路中,按0Abs键,直至显示0.000,再将待测液拉(推)到光路中,即可得出待测液的吸光度值。

注意事项:校0%T与调0.000A是完全不同的两回事,校0%T是用来校准仪器的暗电流,在暗电流有漂移的情况下,用校0%T的方式将暗电流重新置0.0,以避免影响测试结果;调0.000A(相当于调100%T)是针对参比液的,实际上就是扣除配制溶液(即参比液)的吸光度值,以方便测出溶于配制溶液的待测物质的真实吸光度。